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迈杰转化医学实验一致率高 获得市场高度认可

PCR试剂盒


★PCR的作用

通过PCR技术,将数量较少的目的DNA片段进行扩增,从而获得较多数量的目的片段。


★荧光定量PCR原理

简单来说就是在PCR的基础上通过光像采集系统收集荧光,绘制一条反映荧光强度和 PCR循环数之间关系的曲线。


PCR图

★以ARMS为代表的PCR技术

★扩增阻滞突变系统PCR (Amplification Refractory Mutation System PCR,ARMS-PCR),又称为等位基因特异性PCR(Allele-Specific PCR,AS-PCR)。 

★ARMS-PCR技术建立在等位基因特异性延伸反应基础上,只有当某个等位基因特异性引物的3’末端碱基与突变位点处碱基互补时,才能进行延伸反应。常规PCR扩增DNA所用的上、下游引物与靶序列完全匹配,而等位基因PCR采用等位基因特异的两条上游引物,两者在3’端核苷酸不同,一个对野生型等位基因特异,另一个对突变型等位基因特异,在Taq DNA聚合酶作用下,与模板不完全匹配的上游引物将不能退火,不能生成PCR产物,而与模板匹配的引物体系则可扩增出产物,通过凝胶电泳或者qPCR就能很容易地分辨出扩增产物的有无,从而确定SNP基因型,目前市场主流为ARMS+qPCR技术,采用TaqMan探针进行检测。


PCR2图


★ARMS-PCR实例介绍

FISHMEDx

检测以JAK2 V617F基因是否突变: JAK2 V617F基因作为一个独立的分子指标更有效的用于PV、ET等骨髓增殖疾病的诊断。对于JAK2 V617F阴性患者,可排除继发性原因;JAK2 V617F突变为白血病的靶向治疗提供了依据,阳性患者可采用相应药物抑制剂进行治疗;治疗后患者可定期检测JAK2 V617F突变进行MRD监测和疗效监测,观察病情复发情况。

★迈杰转化医学现有平台


迈杰现有PCR平台


★PCR操作步骤(以DNA为例)


PCR操作步骤


★ARMS-PCR优缺点

优点:操作简单、结果易读、灵敏度高、检测全程用时少。

缺点:不能检测未知突变、通量低。



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