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焦磷酸测序平台
焦磷酸测序技术(pyrosequencing)是一种新型的酶联级联测序技术，在遗传分析、 表观遗传和癌症研究 中可以进行基于序列的实时检测和定量。
焦磷酸测序法适用于已知的短序列的测序分析，其重复性和精确性能与Sanger测序相媲美 ，同时还具有通量大、成本低、速度快等特点，为临床检验提供了非常理想的技术操作平台。
焦磷酸测序技术原理
焦磷酸测序技术是由4种酶催化的同一反应体系中的酶级联化学发光反应。焦磷酸测序技术的原理是：引物与模板 DNA 退火后，在 DNA聚合酶(DNA polymerase) 、ATP 硫酸化酶(ATP sulfurytase) ．荧光素酶 (1uciferase)和三磷酸腺苷双磷酸酶 (Apyrase)4
种酶的协同作用下，进行反应：每次加入一个 dNTP, 在聚合酶作用下产生一个焦磷酸（ PPi ）；硫酸化酶将 PPi转化为 ATP ，ATP 使荧光素酶发出荧光； 多余的 dNTP 被降解，开始新一个循环 ，达到实时测定DNA 序列的目的。
焦磷酸测序检测流程
焦磷酸测序的应用
1.
DNA甲基化检测
2.
SNP/等位基因差异表达检测
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